Auswirkungen des Injektionsvolumens bei der HPLC

Die Beziehung zwischen Injektionsvolumen und Peakhöhe ist eine Art linearer Beziehung. Dem Volumen ist das entsprechende Injektionsvolumen der Probe in der HPLC zugeordnet. Das Probenvolumen in der Hochleistungsflüssigkeitschromatographie ist normalerweise fest oder in Autosamplern kann es variabel sein. Die Rheodyne-Probenschleife wird üblicherweise in der HPLC verwendet, um Proben zu injizieren, ohne die Flussrate der mobilen Phase und den Druck des HPLC-Systems zu stören. Die Massenüberladung tritt auf, wenn der Chromatograph zu viele Analyten injiziert, und die Säulenüberladung tritt auf, wenn die überschüssige flüssige Probe in die Säule injiziert wird. Säulen- und Massenüberlastung kann die Säulenleistung aufgrund von Peakform- und Retentionszeitproblemen verringern.

Hier werden einige Effekte des Injektionsvolumens bei der HPLC erwähnt.

• Die Säule ist überlastet, wenn zu viel Probe in die Säule injiziert wird.

• Wenn das Injektionsvolumen erhöht wird, erhöht sich die Höhe des Peaks.

• Die Peakbreite nimmt mit zunehmendem Injektionsvolumen zu.

• Die Spitzenverbreiterung aufgrund von Volumenüberlastungen.

• Durch Erhöhen des Injektionsvolumens wird die Auflösung zwischen den getrennten Verbindungen verringert.

• Wenn ein sehr großes Probenvolumen in die HPLC-Säule injiziert wird, beginnen die Peaks zu schwinden und die Retentionszeit (RT) kann sich erhöhen.

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