HPLC-Injektor - Probeninjektionssystem in der HPLC

Der HPLC-Probeninjektor ist eine Technik zum Laden und Injizieren der Probenlösungen in das HPLC-System. Diese Methode wird mit einem speziell entwickelten Injektor durchgeführt, der sich vor der HPLC-Säule befindet. Für HPLC-Systeme stehen drei Arten von Injektoren zur Verfügung. Rheodyne-Injektor oder Schleifeninjektor, Septuminjektor und Stop-Flow-Injektor.

Einige Anforderungen der HPLC-Injektion sind:

1. Das Injektionsvolumen muss für alle Proben unter einem Experiment gleich sein.

2. Die Proben müssen ohne den störenden Systemdruck und die Flussrate der HPLC injiziert werden.

3. Die Probe sollte frei von Luftblasen sein.

4. Es muss genau sein, da das Volumen der Probe in Mikrolitern (0,1 bis 100 Mikroliter) angegeben ist.

5. Die Probenlösung sollte frei von Partikeln sein.

6. Eine Probenschleife in der Ladeposition wird mit der Probenlösung gefüllt, während sich das System im Gleichgewicht befindet. Während der Rotation zum Injektionspunkt wird die Probenschleife auf den Hochdruckteil des HPLC-Systems umgestellt. Der Fluss der mobilen Phase, die von der HPLC-Pumpe gefördert wird, durch die Schleife und führt die Probe auf die Chromatographiesäule.

• Rheodyne- oder Loop-Injektor als HPLC-Injektionssystem:

Der Rheodyne ist der beliebteste Injektor in der Hochleistungsflüssigkeitschromatographie, da er genau, reproduzierbar und präzise im Probenvolumen ist. Es hat einen Lade- und Injektionsmodus. Die Ladeposition ermöglicht das Laden der Probenlösung in die Schleife mit Hilfe von Spritzen. Nachdem die Probe geladen wurde, lässt der manuell rotierende Probeninjektor die Probe ohne Luftblasen über eine Säule fließen, ohne den Druck zu stören (bis zu 6000 psi). und die Durchflussrate des Systems.

Bei diesem Injektortyp wird die Probe injiziert, indem die Nadel durch das Gummiseptum eingeführt wird.

Der Fluss der mobilen Phase durch die HPLC-Säule wird gestoppt, während die Probe injiziert wird.

• HPLC Autosampler Injektor:

Heutzutage verwenden moderne HPLC-Systeme Autosampler. Das Injektionsventil des Autosamplers ähnelt dem manuellen Ventil; Die Probenlösung wird jedoch mit einer automatischen Spritze aus den Fläschchen in einem motorisierten Tablett injiziert. Im Allgemeinen arbeiten Autosampler, indem sie das verschlossene Probenfläschchen mit einer Nadel durchstechen und entlang der Länge des flexiblen Schlauchs anbringen.

Anschließend wird die Probe aus dem Fläschchen in die Schleife abgesaugt und in die Schleife injiziert, während die Analyten säulenweise getrennt und vom Detektor (UV/ PDA) analysiert werden.

Verweis

A. Wikipedia: https://en.wikipedia.org/wiki/High-performance_liquid_chromatography

B. Knauer: https://www.knauer.net/en/search?q=chromatography

C. Kromasil: https://www.kromasil.com/support/faq.php

D. Shimadzu: https://www.shimadzu.com/an/service-support/technical-support/analysis-basics/basic/what_is_hplc.html

E. Chemische Ansicht: https://www.chemistryviews.org/details/education/9464911/What_is_HPLC/

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