Die Elutionsstärke nimmt während der gesamten Trennung zu, indem die Zusammensetzung der mobilen Phase bei der Gradientenelution allmählich geändert wird. Dadurch verkürzt sich die Analysezeit und die Qualität der Trennung und Nachweisgrenze verbessert sich. Auch wenn die Gradientenmethode im Vergleich zur isokratischen Elution komplexer ist.Vorteile der Gradientenelution:
- Der Gradienten-HPLC-Modus hat die Fähigkeit, komplexe Proben zu trennen.
- Diese Methode ergibt eine erhöhte Empfindlichkeit.
- Die Gradientenelution hat kürzere Analysezeiten und ergibt viel schmalere chromatographische Peaks.
- Es gibt eine verbesserte Auflösung.
- Es kann den Säulendegradation aufgrund stark zurückgehaltener Analyten reduzieren.
- Die Gradienten-HPLC-Methode erhöht auch die Effizienz der HPLC-Säule.
- Dies ist die beste Methode im Vergleich zu einer isokratischen Elution, um die Säule zu reinigen.
Nachteile der Gradientenelution:
- Um die mobile Phase in allmählicher Elution fließen zu lassen, ist eine spezielle HPLC-Pumpe erforderlich, die teurer ist.
- Zwischen aufeinanderfolgenden Injektionen muss es wieder mit der anfänglichen mobilen Phasenzusammensetzung ins Gleichgewicht gebracht werden.
- Es besteht ein Methodentransferproblem, da Instrumente in ihrem Verweilvolumen variieren.
- Niederschlag ist bei Verwendung mehrerer Proportionalventile möglich.
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