Vorteile der Gradientenelution gegenüber der isokratischen Elution

Hochleistungsflüssigkeitschromatographie für die Umkehrphasentrennung hat sowohl eine isokratische Elution als auch eine Gradientenelution, die von Natur aus robust und bequem ist, insbesondere wenn mit Verbindungen gearbeitet wird, deren Polarität stark variiert. Einige der häufigsten Probleme bei isokratischen Trennungen bestehen in einer schlechten Auflösung der anfänglich eluierten Peaks, einer Peakverbreiterung, einer Peakbreite für später eluierte Moleküle aufgrund von Peakdispersion und Peak-Tailing, was häufig zu einer unerwünschten langwierigen Analyse und einer Kontamination der Säulen durch stark zurückgehaltene Analyten führt. Der schrittweise Modus der HPLC kann dazu beitragen, einige dieser Probleme zu lösen, da er normalerweise eine bessere Peakform und die Fähigkeit bietet, Moleküle mit einem breiteren Bereich von Hydrophobizitätswerten zu einem vernünftigen gewünschten Zeitpunkt zu eliminieren.Hier werden einige Vorteile der Gradientenelution gegenüber der isokratischen Elution erwähnt.

• Die Zusammensetzung der anfänglichen mobilen Phase wird so gewählt, dass die Stärke geeignet ist, die anfänglich eluierenden Komponenten zurückzuhalten und aufzulösen.

• Es ist möglich, die Polarität der mobilen Phase nach unseren Anforderungen zu erhöhen oder zu verringern.

• Die Trennstärke wird dann in vorbestimmter Weise erhöht, um die Moleküle mit guter Auflösung zu trennen.

• Wir können die Endzusammensetzung der mobilen Phase auswählen, um die Trennung aller Analyten innerhalb einer angemessenen Zeit zu bestätigen; Dies ist bei der isokratischen Elution nicht möglich.

• Komplexe Probengemische können ohne Zeitaufwand getrennt werden.

• Beim Gradientenverfahren ist es möglich, die Konzentration an organischem Modifikator für die Säulenwäsche zu erhöhen.

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