Volumenrechner für HPLC-Säulen
Die Berechnung des Säulenvolumens und damit die Bestimmung des Säulenhohlraumvolumens und der Kapazitätsfaktoren haben höchste Priorität und primitive Relevanz in der HPLC-Methodenentwicklung.
Zuerst müssen wir verstehen, dass die Säule ein Zylinder ist, der gepacktes Material enthält. Die Formel für das Volumen des Zylinders (Hallow) lautet also
Volumen des heiligen Zylinders =pi × r2× h
Die LC-Säule enthält jedoch gepacktes Material.Im Allgemeinen nimmt es 65% bis 70% des Säulenvolumens ein.Daher brauchen wir die Korrektur für die Berechnung. Die Formel wird dann in diesem Fall so aussehen:
Volumen der Säule (V Null)=(Pi×r2×l×Porenvolumen)
Hier sind r und l in Cms; Pi = 3,14
- r=Radius und l=Länge oder Höhe der Säule.
Ich werde versuchen, eine Beispielrechnung zu geben:
Spaltenabmessungen annehmen: 250 mm x 4,6 mm, 5 um
dann Volumen der Spalte =3.14*0.23*0.23*0.7 ergibt das Ergebnis von 2,908 ml (Wenn r und l als Cms genommen wurden) und 2908uL (Wenn r und l als mms genommen wurden)
Hier nahmen wir ein Porenvolumen von 70% (= 0,7) an.dh interstitielle Poren der Kieselsäure und mittlerer Hohlraum der Säule zusammen als porenvolumen.
Wenn Sie daraus die Retentionszeit (tR) der nicht zurückgehaltenen Verbindung (im Allgemeinen Uracil für RP-Säulen und 1,3,5-Tri-t-Butylbenzol für Normalphasensäulen) haben, können wir berechnen Leerzeit oder Totzeit (t Null)
Wenn tR von Uracil, wenn für zB: 5 Minuten und die Flussrate 1,5 ml / min beträgt, dann
t Null (t0) =Hohlraumvolumen/Durchflussrate
= 2,908 ml/1,5 ml/Minute = 1,94 Minuten.
Retentionsfaktor (k):
=(tr-t0)/t0
=(5–1.94)/1.94=1.58
Wassersäulenrechner
Der Retentionsfaktor (k) ist ein weiteres Maß für die Retention. Es ist das Verhältnis der Zeit, die ein gelöster Stoff in der stationären und mobilen Phase (Trägergas) verbringt.Zum Beispiel wird ein gelöster Stoff mit einem k = 6 doppelt so stark von der stationären Phase (aber nicht von der Säule) zurückgehalten wie ein gelöster Stoff mit einem k = 3. Der Aufbewahrungsfaktor liefert keine absoluten Aufbewahrungsinformationen; er liefert relative Aufbewahrungsinformationen. Eine nicht zurückgehaltene Verbindung hat k = 0.
V Null, t Null und Retentionsfaktor sind miteinander verknüpft
Die folgenden Gleichungen sind für den Anfänger Chromatographer. Weiterführende Berechnungen finden Sie auf den Seiten Systemeignung und Druck-Durchfluss.
1. Berechnung des gesamten Säulenvolumens (wird auch zur Berechnung des Bettvolumens verwendet)
2. Berechnung des linearen Volumenstroms der Leersäule aus dem Volumenstrom
3. Berechnung des Volumenstroms aus Leersäule linearer Durchfluss
1. Berechnung des gesamten Säulenvolumens (wird auch zur Berechnung des Bettvolumens verwendet):
Wo:
V = berechnetes Säulenvolumen
r = Säulenradius
L = Länge der Säule (oder des Festbetts)
2. Berechnung des linearen Volumenstroms der Leersäule aus dem Volumenstrom:
Wo:
u = Lineare Durchflussrate (cm/h)
F = volumenstrom (mL/h) [multiply mL/min x 60 min/hr]r = Säulenradius (cm)
3. Berechnung des Volumenstroms aus Leersäule linearer Durchfluss
Wo:
F = volumenstrom (mL/h) [divide by 60 min/hr to get mL/min]u = Lineare Durchflussrate (cm/h)
r = Säulenradius (cm)
Der Begriff Säulenvolumen, typischerweise abgekürzt CV, ist ein Wert, der zur Bestimmung der Trennqualität und der Ladekapazität verwendet wird. Aber wie kann dieses Konzept und seine Definition besser verstanden werden? Bob Bickler erklärt alles auf dem Flash Purification Blog.
Einige Chemiker denken, dass das Innenvolumen der Kartusche ohne Verpackungsmaterial im Inneren ist das Säulenvolumen. Obwohl es bei der Bestimmung von Skalierungsfaktoren nützlich ist, ist das Volumen der leeren Spalte nicht der Lebenslauf. Der Lebenslauf einer Säule oder Kartusche ist das Volumen innerhalb einer verpackten Kartusche nicht von den Medien besetzt. Dieses Volumen umfasst sowohl das interstitielle Volumen (Volumen außerhalb der Partikel) als auch die eigene innere Porosität des Mediums (Porenvolumen). Zusammengenommen machen die beiden Volumina 70% bis 80% des Volumens der verpackten Kartusche aus. Dies bedeutet natürlich, dass das Medium nur 20% bis 30% des Platzes in der Kassette einnimmt.
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