In der Hochleistungsflüssigkeitschromatographie sind Isokratik und Gradient Trennmethoden, die für die Trennung von Analyten sehr nützlich sind. Der Trennmodus, bei dem die Zusammensetzung der mobilen Phase während des Prozesses konstant bleibt, wird als isokratische Elution bezeichnet. Im Allgemeinen ist es in der Umkehrphasenchromatographie weit verbreitet. Die isokratische Methode ist normalerweise erfolgreich bei der Trennung von Probenmolekülen, die in ihrer Affinität zur stationären Phase ungewöhnlich sind. Viele Chromatographen schlagen vor, dass, wenn eine isokratische Elution für Sie funktioniert, die Verwendung des Gradienten vermieden wird.
Vorteile der isokratischen Elution in der HPLC:
- Es ist keine spezielle HPLC-Pumpe erforderlich, um die Lösungsmittel / mobile Phase zu fördern.
- Die Methodenübertragung ist einfach möglich.
- Es ist nicht erforderlich, zwischen aufeinanderfolgenden Injektionen ein erneutes Gleichgewicht mit der anfänglichen mobilen Phasenzusammensetzung herzustellen.
- Es ist eine kostengünstige Methode im Vergleich zur Gradientenelution.
- Es ist eine einfache Art der Trennung im Vergleich zur Gradientenelution.
Nachteile der isokratischen Elution in der HPLC:
- Dies ist eine zeitaufwändige Methode.
- Der Hauptnachteil besteht darin, dass die verzögerten Elutionspeaks sehr breit und flach werden.
- Schlechte Auflösung der anfänglichen Elutionsspitzen.
- Dies wird eine begrenzte Anzahl von Molekülen trennen.
- Die Selektivität ändert sich nicht, wenn sich die Spaltenabmessungen ändern.
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