👩🔬 Das Prinzip der Affinitätschromatographie ✔️HPLC

Bei der Affinitätschromatographie werden die Proteine nach der Unähnlichkeit in ihrer Bindungsaffinität getrennt. Es besteht eine hohe Bindungsaffinität für spezifische Liganden in Enzymen, Antikörpern und Rezeptoren.

Während das Proteingemisch durch eine Säule geleitet wird, die aus einem Material mit legendengekoppelter Matrix besteht, können nur Proteine zurückgehalten werden, die den Liganden binden. Das Zielprotein wird durch eine Lösung von der Säule eluiert, die um das Ziel der Proteinbindung, also den Liganden, konkurriert.

Das Prinzip der Affinitätschromatographie ist wie folgt:

1. Injizieren Sie zunächst eine Probe in eine äquilibrierte Affinitätschromatographiesäule.

2. Die Substanz, in der eine Affinität zum Liganden besteht, nur die Substanz, die in der Säule zurückgehalten wird.

3. Die Substanz wird von der Säule eluiert, in der keine Affinität zum Liganden besteht.

4. Durch Modifizieren der Salz- oder organischen Lösungsmittelkonzentrationen oder des pH-Werts können zurückgehaltene Substanzen von der Säule eluiert werden.Affinitätschromatographie wird breit für die Trennung und Reinigung mit den spezifischen Eigenschaften verwendet.

Verweis

A. Wikipedia: https://en.wikipedia.org/wiki/High-performance_liquid_chromatography

B. Knauer: https://www.knauer.net/en/search?q=chromatography

C. Kromasil: https://www.kromasil.com/support/faq.php

D. Shimadzu: https://www.shimadzu.com/an/service-support/technical-support/analysis-basics/basic/what_is_hplc.html

E. Chemische Ansicht: https://www.chemistryviews.org/details/education/9464911/What_is_HPLC/

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Laboranalytikerin

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