HPTLC-Chromatographie - Prinzip und Vorgehensweise

Was ist Hochleistungs-Dünnschichtchromatographie?

Der HPTLC die Technik ist eine automatisierte und anspruchsvolle Form der Dünnschichtchromatographie mit überlegener und fortschrittlicher Trenneffizienz und Nachweisgrenzen und ist oft eine außergewöhnliche Alternative zur Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) und Gaschromatographie (GC). Die Hochleistungsdünnschichtchromatographie ist auch als Flachbettchromatographie oder als Planarchromatographie bekannt.

Hochleistungs-Dünnschichtchromatographie (HPTLC) Prinzip
Die HPTLC arbeitet nach den gleichen Prinzipien wie die DC, da das Prinzip der Trennung die Adsorption ist. Die mobile Phase oder das Lösungsmittel fließt durch die Kapillarwirkung. Die Analyten bewegen sich entsprechend ihrer Affinität zur stationären Phase (Adsorbens). Die Komponente mit höherer Affinität wandert langsamer in Richtung stationäre Phase. Eine Komponente mit niedriger Affinität wandert schnell in Richtung der stationären Phase. Auf einer Chromatographieplatte werden dann die Komponenten getrennt.

Prinzip und Verfahren von HPTLC-Chromatographie

Experimentelles Verfahren der HPTLC

• Vor Beginn einer HPTLC experimentieren Sie, wir müssen die verschiedenen Komponenten erkennen, die für die Durchführung des Prozesses wesentlich sind.
• Ein Werkzeug, das für die Probenahme als Bänder geeignet ist, um die Größe und Position des Tests sowie das aufgebrachte Probenvolumen zu überwachen.
• Eine geeignete Chromatographiekammer, die Entwicklungsabstand und Kontrolle der Sättigung bietet.
• Ein Gerät, das zur Steuerung des Verhaltens stationärer Phasen durch relative Luftfeuchtigkeit geeignet ist.
• Ein Werkzeug, das zum reproduzierbaren Trocknen der entwickelten Platte geeignet ist.
• Geeignete Ausrüstung für den Reagenzientransfer und die Erwärmung.
• Ein Werkzeug zur elektronischen Dokumentation von Chromatogrammen.

Versuchsdurchführung für HPTLC

1.Probenvorbereitung:
Dies erfordert eine hochkonzentrierte Lösung, da viel weniger Probenmenge aufgetragen werden muss. Die Lösungsmittel der Platte müssen unpolar vom flüchtigen Typ sein. Polare Lösungsmittel werden üblicherweise zum Auflösen von Proben für die Umkehrphasenchromatographie verwendet.
2.Auswahl chromatographischer Schichten:
Die Schicht aus HPTLC ist in Form von Kieselgel-Vorbeschichtungen mit sehr feiner Partikelgröße erhältlich, die häufig als Adsorptionsmittel verwendet werden.
3.Vorwäsche:
Gegen Wasserdampf oder flüchtige Verunreinigungen müssen die Platten gereinigt werden. Es kann mit einem geeigneten Lösungsmittel wie Methanol gereinigt werden.
4. Klimaanlage:
Die Platten werden 15 bis 20 Minuten bei 120 ° C in einen Ofen gestellt, um eine Konditionierung durchzuführen.
5. Beispielanwendung:
Die Größe des Probenflecks ist nicht größer als 1 mm im Durchmesser. Es gibt verschiedene Methoden, um Proben in der HPTLC zu erkennen. Eine ist eine selbstladende Kapillare, in der kleine Probenmengen auf die aufgetragen werden können HPTLC Platte.
6. Vorkonditionierung:
Eine Sättigung ist für hochpolare mobile Phasen erforderlich, während eine Sättigung für mobile Phasen mit niedriger Polarität nicht erforderlich ist.
7. Mobile Phase der HPTLC:
Durch Versuch und Irrtum soll die mobile Phase der geeigneten Lösungsmittel selektiv sein.
8. Chromatographische Entwicklung:
Die lineare Entwicklungsmethode in der Hochleistungsdünnschichtchromatographie ist die gebräuchlichste Technik, hier wird die Platte vertikal in einem geeigneten Behälter mit einem Lösungsmittel oder einer mobilen Phase positioniert. Die mobile Phase wird im Allgemeinen durch Kapillarwirkung zugeführt und beide Seiten können Chromatogramme erzeugen.
9. Erkennung von Spot und Scannen:
Das HPTLC-Instrument ist an Computer- und Datenaufzeichnungsgeräte angeschlossen. Die Entwicklung von Flecken wird als Peaks bei Wellenlängen ausgewählter UV-Regionen angesehen. Die Höhe und die Fläche der Peaks werden vom Gerät bestimmt und in Prozent aufgezeichnet.

Prinzip und Verfahren von HPTLC-Chromatographie

Hochleistungs-Dünnschichtchromatographie (HPTLC) Anwendungen

1. Hochleistungsdünnschichtchromatographie wird zur qualitativen und quantitativen Analyse von Molekülen eingesetzt.
2. HPTLC kann die Konzentration von Komponenten abschätzen, obwohl DC nur Komponenten trennen kann.
3. HPTLC kann eine komplexe Struktur oder eine sehr kleine Menge von Verbindungen analysieren.
4. Diese Methode wird in der Lebensmittelindustrie verwendet, um Nährstoffe, Getränke, Vitamine und Pestizide in Obst, Gemüse und anderen Lebensmitteln zu bewerten.
5. HPTLC ist nützlich bei der forensischen Erkennung von Substanzen, einschließlich Verfälschungen, Überdosierungen, gefälschten Medikamenten und Drogenmissbrauch.
6. Um die Substanzen einschließlich Drogenmissbrauch, Überdosierung, Verfälschung, gefälschte Medikamente zu identifizieren, wird es verwendet forensische Abteilung.
7. HPTLC wird in Pharmazeutika zur Qualitätskontrolle eingesetzt.
8. HPTLC wird für die Analyse von erzwungenen Abbaustudien, Stabilitätstests und zur Überprüfung des Vorhandenseins von Verunreinigungen im Arzneimittel verwendet.

Prinzip und Verfahren von HPTLC-Chromatographie

Die Vorteile von HPTLC sind wie folgt.

• Mehr als ein Analyst arbeitet gleichzeitig am System.
• HPTLC kann gemeinsam genutzt werden, da es keiner Probe gewidmet ist.
• Die vorbeschichteten Platten von HPTLC sind zu günstigen Preisen erhältlich.
• Es gibt weniger Wartungskosten im Vergleich zu anderen Geräten.
• HPTLC hat eine breite Palette von stationären Phasen.

• Bei der HPTLC besteht keine Kontaminationsgefahr, da die frisch zubereitete mobile Phase und die stationäre Phase verwendet werden.
• Mobile Phasen werden für die Filtration und Entgasung wie HPLC nicht benötigt.
• Es ist hochempfindlich, reproduzierbar und präzise im Vergleich zu einer Dünnschichtchromatographie.

Die Nachteile von HPTLC sind wie folgt.

• Kurzes Trennbett ist ein Hauptnachteil der HPTLC
• Es kann eine begrenzte Anzahl von Proben pro Platte getestet werden.
• Manchmal ist während der Detektion Kieselgel vorhanden.

Häufig gestellte Fragen zur Dünnschichtchromatographie lauten wie folgt.

Was ist das Grundprinzip der HPTLC?
Die HPTLC hat ähnliche Ansätze und folgt den gleichen physikalischen Prinzipien wie die DC, d. H. Die Adsorptionschromatographie.

Welche Art von Chromatographie ist HPTLC?
HPTLC ist eine Art planare Chromatographie und die fortschrittlichste instrumentelle Methode der Dünnschichtchromatographie.

Woraus besteht die HPTLC-Platte?
Kieselgel wird häufig für die Herstellung von HPTLC-Platten verwendet. HPTLC-Platten sind auf einem Glas- oder Aluminiumträger mit verschiedenen Sorptionsmitteln erhältlich.

Was ist der große Vorteil der Hochleistungsdünnschichtchromatographie (HPTLC)?
Der Hauptvorteil der HPTLC besteht darin, dass sie in der Lage ist, mehrere Proben gleichzeitig zu analysieren.

Was ist der Hauptunterschied zwischen HPTLC und HPLC?
Der Hauptunterschied zwischen HPTLC und HPLC besteht darin, dass HPTLC die verbesserte Dünnschichtchromatographiemethode ist, während HPLC ein verbesserter Flüssigchromatographietyp ist.

Verweis

A. Wikipedia: https://en.wikipedia.org

B. Knauer: https://www.knauer.net

C. Kromasil: https://www.kromasil.com

D. Shimadzu: https://www.shimadzu.com

E. Chemische Ansicht: https://www.chemistryviews.org

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