¿Wie vermeidet man Peak-Tailing in der HPLC-Chromatographie?

Die breiten Peaks, geteilten Peaks und variablen Peakhöhen bei der HPLC können unvollständig gefüllte Proben in der Probenschleife oder im Injektor sein, Unverträglichkeit von Probenlösungsmitteln mit der mobilen Phase. Es ist gut, die Probenkomponenten nach Möglichkeit in der mobilen Phase aufzulösen und zu injizieren. Oder stellen Sie sicher, dass das Injektionslösungsmittel im Vergleich zur mobilen Phase eine geringere Stärke aufweist.

Beachten Sie, dass mehrere Autosampler unterschiedliche Spritzenwaschlösungen verwenden. Stellen Sie sicher, dass diese Lösung schwächer als die mobile Phase und damit kompatibel ist. Dies ist besonders wichtig beim Austausch zwischen umgekehrter und normaler Phasenanalyse.

Die Schutzsäulen und Filter verhindern, dass sich die stark zurückgehaltenen Verbindungen und Partikel auf der HPLC-Säule ansammeln. Die Lebensdauer solcher Geräte hängt von der Zusammensetzung der mobilen Phase, dem pH-Wert der mobilen Phase und der Reinheit der Probe usw. ab. Wenn diese Produkte verstopft oder mit Partikeln kontaminiert werden, steigt der Systemdruck und die Spitzen werden breiter.

Einige der Ursachen für Peak-Tailing in der HPLC-Chromatographie sind nachstehend aufgeführt.

• Bereiten Sie die Probe nach Möglichkeit in der gleichen mobilen Phase vor, die Sie für die Trennung verwenden.
• Überlasten Sie die Säule nicht.
• Wenn die Retentionszeit zu lang ist, zeigt sie Spitzenrückstände an. Modifizieren Sie die Methode so, dass Peaks früher eluieren.
• Große Mengen an zusätzlicher Säule verursachen daher nach Möglichkeit Spitzenrückstände, wodurch der Rohrdurchmesser und die Länge zum Schutz verringert werden, insbesondere in Nachsäulen.
• Die Ausfällung der Probe bewirkt eine langsame Auflösung der Analyten und verursacht Spitzenrückstände. Stellen Sie daher sicher, dass das Molekül mit Ihrem Lösungsmittel richtig löslich ist.
• Wenn die Detektorzeit zu langsam ist, erhöhen Sie die Hz-Rate des Detektors.
• Wenn das Säulenvolumen zu groß ist, führt dies zu Rückständen, daher reduzieren Sie nach Möglichkeit die Längen und Rohrdurchmesser, hauptsächlich nach der Säule.
• Überprüfen Sie den PK A-Wert des Analyten und halten Sie den pH-Wert der mobilen Phase nach Bedarf aufrecht (+/- 2 pH von PK a).
• Verwendung einer kontaminierten Säule.
• Verstopfte oder verschmutzte Schutzsäulen und Filter verursachen Schwanz.

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