Uplc vs Hplc ¿Was ist der Unterschied zwischen? 👩‍🔬

UPLC gegen HPLC

Uplc gegen Hplc // UHPLC und UPLC beide Flüssigchromatographietechniken werden verwendet, um die verschiedenen Komponenten in Mischungen zu trennen.

Kommentar: Die angegebene Prämisse impliziert einen Unterschied zwischen UHPLC und UPLC, obwohl es sich tatsächlich um dieselben Techniken handelt. Im Jahr 2004 brachte Waters die als UltraPerformance LC (UPLC) bekannte Technik auf den Markt, die auf porösen Partikeln im Sub2-Mikrometer-Bereich basiert, und ließ sich das Akronym UPLC schützen. Als Anbieter mit ähnlichen Instrumenten auf den Markt kamen, wurde UHPLC geprägt, um auf Instrumente zu verweisen, die UPLC ähneln, da UPLC eine Marke von Waters ist. Die beiden Begriffe werden synonym verstanden. Die Basistechnologie für UHPLC- und UPLC-Instrumente sind Partikel im Sub-2-Mikrometer-Bereich; Die meisten HPLC-Methoden werden für Partikel mit einer Größe zwischen 2,5 und 5 Mikrometern entwickelt. Die kleineren Partikel im Sub2-Mikrometer-Bereich erfordern einen höheren Druck, um damit zu arbeiten, so dass UHPLC- oder UPLC-Systeme in der Lage sein müssen, über 6.000 PSI zu arbeiten, was typischerweise die obere Grenze herkömmlicher HPLC ist.

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Ein Gemisch ist ein Stoff, der zwei oder mehr chemische Elemente und Verbindungen umfasst, die während einer chemischen Reaktion nicht miteinander verbunden wurden.

Kommentar: "Flüssigkeitschromatographie" ist die Trennung von Komponenten, die zusammen in einer Flüssigkeit gelöst sind. Durch die Verwendung einer Säule interagieren / diffundieren die Komponenten in der Mischung in größerem oder geringerem Maße über die Säule und in ihre Poren oder Oberfläche und werden getrennt. Da Partikel im Sub2-Mikrometer-Bereich so klein sind, ist der Diffusionsweg zwischen den Probenanalyten und der stationären Phase kürzer und die Effizienz höher. Feste Kernpartikel, die jetzt auf dem Vormarsch sind, sind von einer Oberfläche kleiner Partikel eingekapselt, so dass die Diffusion der Weg ist noch geringer und die Effizienz ist höher, hängt aber immer noch von der "Dicke" der Partikelschicht um den festen "Kern" ab.

Die Vorgänger von HPLC, UHPLC und UPLC beruhten auf Pumpen, die eine unter Druck stehende Flüssigkeit, die eine Probenmischung enthielt, durch saugfähige Materialien leiteten.

In den letzten 6 Jahren sind UHPLC und UPLC in den Vordergrund gerückt. Sowohl UHPLC als auch UPLC ermöglichen es Wissenschaftlern, sich schneller mit kleineren Partikeln auseinanderzusetzen, als dies bisher möglich war. Zwischen den beiden Systemen bestehen jedoch wesentliche Unterschiede.

Kommentar: Anstatt sich mit kleineren Partikeln auseinandersetzen zu müssen, ermöglichen UHPLC und UPLC Wissenschaftlern, sich auseinanderzusetzen mit mehr analytischen Herausforderungen schneller als bisher möglich.

¿Was ist UPLC?

UPLC-Systeme (Ultra Performance Liquid Chromatography) wurden erstmals 2004 eingeführt. Durch die nahezu Verdoppelung des Gesamtbetriebsdrucks (auf 15.000 psi), um schnellere Durchflussraten zu erzielen, konnten UPLC-Entwickler LC-Trennungen mit gleicher oder besserer Auflösung in viel kürzeren Zeiträumen erzielen.

Kommentar: Anstatt "den Gesamtbetriebsdruck zu verdoppeln, um schnellere Durchflussraten zu erzielen", ist es besser zu sagen … “Um die Vorteile von 2-Mikron-Partikeln zu nutzen, sind höhere Drücke erforderlich." Der typische ID einer UPLC-Säule beträgt 2,1 mm und im Allgemeinen sind die Flussraten niedriger als bei der HPLC, aber aufgrund der oben erläuterten Effizienzsteigerung wird die Gesamttrennzeit verkürzt.

¿Was ist UHPLC?

Im Gegensatz dazu arbeitet die UHPLC (Ultrahochleistungsflüssigkeitschromatographie) im Bereich von 20.000 psi.

Kommentar: Das stimmt einfach nicht. Einige UHPLC-Systeme können so hoch gehen, aber nicht alle. Im Allgemeinen sind UPLC-Instrumente Systeme mit geringerer Dispersion und geringerem Volumen (zusätzliche Säulen), die bei höheren Drücken arbeiten können.?

In Bezug auf Effizienz, Genauigkeit und Produktivität waren dies gute Nachrichten für Labore auf der ganzen Welt. UPLC ist eine Variante der HPLC, die ebenfalls Säulen und Pumpen verwendet.

Kommentar: Ob HPLC, UPLC oder UHPLC, jede dieser Techniken verwendet Säulen und Pumpen.

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Im Gegensatz zu UPLC ist der Name nicht markenrechtlich geschützt und kann sich auf eine Reihe von Herstellersystemen beziehen. UHPLC-Systeme wurden mit Blick auf ein geringes Verweilvolumen entwickelt.

Kommentar: Verweilvolumen ist ein Begriff, der sich auf Gradiententrennungen bezieht; zusätzliches Säulenvolumen und Dispersion sind bessere Begriffe. UPLCs haben geringere Verweilvolumina, dies liegt jedoch daran, dass das zusätzliche Säulenvolumen minimiert wird. Eine geringe Lautstärke ist nicht das einzige Leistungsmerkmal eines UPLC-Systems.

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Sie bieten höhere Wirkungsgrade als UPLC-Systeme, sind aber auch anfällig für Verstopfungen.

Kommentar: Nicht sicher, woher das kommt. Wenn eine Probe nicht richtig vorbereitet wird, ist es möglich, eine UHPLC- oder UPLC-Säule im Sub-2-Mikrometer-Bereich zu verstopfen. Es ist die Säule, die verstopfen kann, nicht das System.

¿Wofür werden UPLC- und UHPLC-Systeme verwendet?

UPLC und UHPLC wurden für viele Zwecke verwendet, einschließlich rechtlicher, pharmazeutischer und medizinischer Zwecke. Die Systeme sind auch wichtige Werkzeuge in den Bereichen Forschung und Fertigung. Ohne HPLC, UPLC und UHPLC würden Wissenschaftler Schwierigkeiten haben, das Vorhandensein von leistungssteigernden Medikamenten in den von Sportlern bereitgestellten Proben nachzuweisen, während der Nachweis von Vitamin-D-Spiegeln im Blutserum viel länger dauern würde als heute.

Kommentar: Die Geschwindigkeit, Auflösung und Empfindlichkeit von UHPLC- und UPLC-Geräten machen sie ideal für den Einsatz mit MS. Die Erschwinglichkeit und Benutzerfreundlichkeit einer neuen Generation von MS-Geräten macht LC-MS für mehr Labore praktischer.

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Diese Technologien stellen daher einen wichtigen Fortschritt dar. Natürlich werden beim Lesen dieses Artikels noch schnellere und genauere Technologien entwickelt. Vorerst bleiben UPLC- und UHPLC-Systeme jedoch an der Spitze vieler wissenschaftlicher Bemühungen.

In letzter Zeit haben Fortschritte sowohl in der analytischen Instrumentierung als auch in der stationären Phasenchemie dazu geführt, dass Chromatographen die Systeme und Methoden, die sie täglich verwenden, neu bewerten.

Verweis

A. Wikipedia: https://en.wikipedia.org/wiki/High-performance_liquid_chromatography

B. Knauer: https://www.knauer.net/en/search?q=chromatography

C. Kromasil: https://www.kromasil.com/support/faq.php

D. Shimadzu: https://www.shimadzu.com/an/service-support/technical-support/analysis-basics/basic/what_is_hplc.html

E. Chemische Ansicht: https://www.chemistryviews.org/details/education/9464911/What_is_HPLC/

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